-
Lactobacillus casei
1.1. Materiales para el cultivo de L. casei
1.2. Procedimiento
-
Saccharomyces cerevisiae
2.1. Materiales para el cultivo de S. cerevisiae
2.2. Procedimiento
IMPORTANTE: Es de vital importancia que en todo momento seguiremos las normas de seguridad y esterilidad necesarias en cualquier laboratorio de microbiología, procediendo siempre de la manera más rigurosa posible y evitando en todo momento la contaminación de las muestras o el material. Todo el instrumental debe estar debidamente esterilizado y autoclavado y al acabar, los residuos serán depositados en un contenedor adecuado y el material volverá a ser debidamente autoclavado para un posterior uso.
(“Lactobacillus casei”. AJC1, 2013 (www.microbiologybytes.com))
- Placas de petri con Agar TSA x 9
- Tubos de ensayo con tapón x 4
- Micropipeta de 0,5 mL
- Micropipeta de 0,1 mL
- Caja de puntas de micropipeta estériles
- Estufa de cultivo a 25 - 30ºC
- Muestra de Lactobacillus casei
-
En un tubo de ensayo, preparar una suspensión. Para ello, disolver 0,1 mL de yogurt fermentado con L.casei en 4,5 ml de agua destilada y esterilizada para preparar la solución madre.
-
Realizar tres diluciones decimales de esta solución madre: Para ello prepararemos tres tubos con 4,5 mL de agua destilada y esterilizada. En el primero añadiremos 0,5 mL de solución madre, obteniendo la dilución 1 (=10-1). Para preparar la siguiente dilución cogeremos 0,5 mL de la dilución 1 y la añadiremos a otro tubo con 4,5 mL de agua destilada y esterilizada, obteniendo así la dilución 2 (=10-2). Por último para preparar la tercera dilución, añadiremos 0,5 mL de la dilución 2 en otro tubo con los 4,5 mL de agua destilada y esterilizada obteniendo así la dilución 3 (=10-3).
-
Coger 0,1 ml de cada disolución de Lactobacillus casei y sembrarlos mediante extensión uniforme con asa de cristal sobre una placa con agar TSA. Este proceso se repetirá tres veces por disolución. Cada placa quedará marcada con rotulador permanente (nombre, dilución, organismo…) para su posterior identificación.
-
Las placas sembradas serán introducidas con el medio hacia abajo, en una estufa oscura (medio aeróbico) a unos 25 - 30ºC durante un periodo entre 24 a 48h.
-
Una vez terminado el tiempo de espera se procederá a la observación de los resultados, toma de fotografías y la estimación de unidades formadoras de colonias (UFC) mediante la técnica de recuento en placa.
(“Saccharomyces cerevisiae”. Bob Blaylock, 2010)
- Placas de petri con Agar TSA x 9
- Tubos de ensayo con tapón x 4
- Micropipeta de 0,5 mL
- Micropipeta de 0,1 mL
- Caja de puntas de micropipeta estériles
- Estufa de cultivo a 25-30 ºC
- Muestra de levadura prensada (Saccharomyces cervisiae)
-
En un tubo de ensayo, preparar una suspensión. Para ello, disolver 0,5 g de la muestra con S. cervisiae en 4,5 mL de agua destilada y esterilizada.
-
Realizar tres diluciones decimales de esta solución madre: Para ello prepararemos tres tubos con 4,5 mL de agua destilada y esterilizada. En el primero añadiremos 0,5 mL de solución madre, obteniendo la dilución 1 (=10-1). Para preparar la siguiente dilución cogeremos 0,5 mL de la dilución 1 y la añadiremos a otro tubo con 4,5 mL de agua destilada y esterilizada, obteniendo así la dilución 2 (=10-2). Por último para preparar la tercera dilución, añadiremos 0,5 mL de la dilución 2 en otro tubo con los 4,5 mL de agua destilada y esterilizada obteniendo así la dilución 3 (=10-3).
-
Coger 1 ml de la solución con Saccharomyces cerevisiae y sembrarlos mediante extensión uniforme con asa de cristal sobre una placa con agar TSA. Este proceso se repetirá tres veces por disolución. Cada placa quedará marcada con rotulador permanente (nombre, dilución, organismo…) para su posterior identificación.
-
Las placas sembradas serán introducidas con el medio hacia abajo, en una estufa oscura (medio aeróbico) a unos 25 - 30ºC durante un periodo entre 24 a 48h.
-
Una vez terminado el tiempo de espera se procederá a la observación de los resultados, toma de fotografías y la estimación de unidades formadoras de colonias (UFC) mediante la técnica de recuento en placa.